10.3969/j.issn.1004-2806-B.2007.06.001
实时荧光定量PCR检测人类EZH2基因方法的建立
目的:建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类EZH2基因的方法.方法:将EZH2 RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM-T后,经测序鉴定正确后,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测EZH2,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果:该法检测的最低拷贝数为10,线性范围为101~108拷贝,相关系数r为-1.00,104copies/μl标本的批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.0%和2.7%.熔解曲线分析显示单一的峰,熔解温度(Tm)为(83.42±0.13)℃.结论:实时荧光定量PCR方法检测EZH2基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究EZH2的方法.
EZH2基因、SYBR GreenⅠ、实时荧光定量PCR
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Q343.1(遗传学分支学科)
湖北省科技攻关项目2005AA304B08
2008-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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