脂肪干细胞和血管内皮细胞共培养复合脱细胞基质材料修复兔尿道缺损的实验研究

摘要：

目的 本实验拟探讨应用脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)和血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VEC)体外共培养,联合脱细胞基质材料构建人工尿道修复兔尿道缺损的效果. 方法 体外分离培养、扩增获得兔脂肪干细胞和血管内皮细胞,分别将ADSCs、VEC以及二者共培养细胞群与脱细胞基质结合.将48只雄性成年新西兰兔阴茎腹侧尿道制作成缺损长度为2.0 cm的动物模型,然后利用随机数字表法分为4组.无细胞对照组:单纯应用异种脱细胞基质修复组.ADSCs组:脂肪干细胞复合异种脱细胞基质手术修复组;VEC组:血管内皮细胞复合脱细胞基质手术修复组;ADSCs与VEC共培养组:ADSCs与VEC共培养后复合异种脱细胞基质手术修复组.分别于术后第1周、2周、4周、8周取各组实验动物的重建尿道组织,进行组织学及免疫组化观察分析.术后第8周观察各组动物排尿情况,记录有无尿瘘和尿道狭窄. 结果 体外培养扩增的ADSCs呈梭形生长,VEC形态多样,呈铺路石样;两者共培养7d时部分细胞仍保持原有的梭形,另外一部分细胞呈多角形,巢样分布,14 d时观察可见细胞间存在许多相互连接的突触,并且部分细胞可融合成团块状.术后4周、8周分别对各组兔子尿道行免疫组织化学染色分析,可见ADSCs与VEC共培养组上皮血管内皮细胞因子(VEGr)、平滑肌肌动蛋白(a-SMA)明显多于无细胞对照组、ADSCs组、VEC组.术后8周无细胞对照组并发症发生率为75％(9/12),ADSCs组为41.7％(5/12),VEC组为33.3％ (4/12),ADSCs与VEC共培养组为16.7％(2/12),四组间差异有统计学意义(x2=8.914,P＜0.05).进一步两两比较发现,无细胞对照组与ADSCs与VEC共培养组相比差异有统计学意义(P ＜0.0083).无细胞对照组与ADSCs组、无细胞对照组与VEC组、ADSCs组与VEC组、ADSCs组与ADSCs和VEC共培养组及VEC组与AD-SCs和VEC共培养组比较,差异均无统计学意义(P＞0.0083). 结论 ADSCs和VEC经体外共培养后可作为种子细胞应用于组织工程尿道的构建和尿道缺损的修复.VEC可诱导ADSCs向上皮细胞方向转变,并增加尿道组织血管的发生.

关键词：组织工程、脂肪干细胞、内皮细胞、共同培养技术、脱细胞基质、尿道/损伤

所属期刊栏目：19

分类号：R695;R318(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：河南省医学科技攻关计划项目;河南省医学科技攻关计划项目;河南省高等学校重点科研项目计划

在线出版日期：2020-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：310-316