百草枯致大鼠肺泡上皮细胞损伤模型的建立及miR-210的介导机制研究

摘要：

目的 探讨构建百草枯(paraquat,PQ)致大鼠肺泡上皮细胞损伤模型及miR-210的介导机制.方法 采用不同浓度的PQ溶液(0、10、100、300、500、1000 μmol/L)干预大鼠肺泡上皮细胞株RLE-6TN细胞,不同干预时间(6、12、24、48及72 h)应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术检测细胞活性.PQ干预RLE-6TN细胞,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞miR-210的表达;RLE-6TN细胞转染miR-210 inhibitor,应用RT-PCR检测细胞miR-210的表达;取RLE-6TN细胞及转染后细胞分为阴性对照组、PQ干预组、PQ+ control inhibitor组、PQ+ miR-210inhibitor组,阴性对照组不给予PQ干预,其余3组PQ干预(500 μmol/L)24 h时应用RT-PCR检测细胞miR-210的表达,应用流式细胞术检测细胞活性.结果 在相同干预时间下,细胞存活率随PQ浓度的增加而降低,在干预浓度为500 μmol/L时PQ对细胞活性影响最为显著;不同浓度PQ干预24 h时,miR-210表达水平均显著升高,当干预浓度为500、1000 μmol/L时,miR-210表达水平较其他浓度明显升高(P＜0.01);当抑制细胞miR-210表达后,PQ致RLE-6TN细胞损伤显著减轻.结论 本实验成功建立了合适的PQ致肺泡上皮细胞损伤模型;miR-210高表达是PQ致肺泡上皮细胞损伤的重要机制之一,miR-210可能在活性氧的产生与氧化应激作用介导下参与了PQ致肺泡上皮细胞损伤.

关键词：百草枯、氧化应激、microRNA、miR-210、大鼠

所属期刊栏目：29

分类号：R916.4;R-332(药物基础科学)

资助基金：中南大学硕士生自主探索创新项目2014zzts366

在线出版日期：2016-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：98-104