重组人血管非炎症分子1促进梗阻性肾病肾小管细胞分泌TGF-β加重肾纤维化的实验研究

摘要：

目的 本研究拟明确重组人血管非炎症分子1(recombinant human vascular non-in-flammatory molecule 1,VNN1)在梗阻性肾病后肾间质纤维化过程中的作用及相关机制.方法 选取Balb/c野生型、VNN1基因敲除雄鼠,分别设置假手术组、手术组.术后当天、14 d留取梗阻侧肾盂尿液、肾组织标本,检测尿液转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)水平,免疫组化明确肾组织VNN1表达水平.肾组织完善过碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)明确肾脏损伤严重程度,马松染色(Masson)、免疫组化检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth mus-cle actin,α-SMA)表达水平,明确肾组织纤维化严重程度.提取野生型和VNN1基因敲除小鼠原代肾小管上皮细胞,传代至第2代,予以血管紧张素刺激,模拟体内梗阻性肾病模型,收取细胞和上清,检测VNN1蛋白水平和上清TGF-β表达水平.结果 梗阻性肾病后第14天,手术组PAS染色提示肾组织损伤明显,免疫组化提示肾组织VNN1表达水平明显升高.进一步完善肾组织Masson染色,免疫组化检测α-SMA水平,发现野生型小鼠间质纤维化水平较VNN1基因敲除鼠明显加重,α-SMA水平明显升高.进一步检测梗阻侧尿液TGF-β水平发现,VNN1基因敲除鼠梗阻侧尿液TGF-β水平明显降低.我们进一步通过细胞实验证实,予以血管紧张素刺激后,野生型小鼠肾小管细胞VNN1蛋白表达水平明显升高,野生型小鼠肾小管细胞上清中TGF-β水平明显高于VNN1基因敲除鼠.结论 VNN1可促进梗阻性肾病肾小管上皮细胞TGF-β分泌,加重肾纤维化.

关键词：重组人血管非炎症分子1、转化生长因子β、梗阻性肾病、肾小管细胞

所属期刊栏目：21

资助基金：国家自然科学基金目资助;重庆市技术创新与应用发展专项面上项目资助

在线出版日期：2021-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：672-676