10.3969/j.issn.1671-2390.2020.12.011
RNA m6A甲基化参与肾脏纤维化进展的实验研究
目的 本研究探讨肾脏纤维化过程中RNA m6A水平的变化,为深入探讨和研究RNA m6A在肾脏纤维化中的变化及作用机制提供实验基础和理论依据.方法 采用C57BL/6小鼠单侧输尿管结扎方法建立肾脏纤维化小鼠模型(unilateral ureteral obstruction,UUO).随机分为假手术(Sham)组和UUO组.首先运用质谱法检测两组肾脏RNA m6A含量变化,进一步运用RNA甲基化免疫共沉淀(methylated RNA Immunoprecipitation,MeRIP)测序方法检测两组肾脏RNA m6A具体修饰位点的变化情况.在明确纤维化肾脏存在RNA m6A异常修饰后,我们通过RT-PCR方法,进一步筛选肾脏RNA m6A相关的调控酶.结果 与Sham组相比,UUO组肾脏RNA m6A含量显著升高.MeRIP测序分析发现甲基化水平差异>1.5倍的位点共1352个,其中上调位点906个,下调位点446个,包括细胞连接、炎症反应、转分化、钙离子结合、细胞黏附等相关的基因.RT-PCR筛选结果提示甲基转移酶样蛋白(methyltransferase-like protein,METTL)14可能为关键调控酶.结论 RNA m6A表观遗传调控参与肾脏纤维化发生,METTL14可能是关键调控酶.
肾脏纤维化、RNA甲基化、Mettl14
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国家自然科学基金-重大研究计划No.91849123
2021-01-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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