高糖对大鼠肾间质成纤维细胞PINCH-1表达的影响

摘要：

目的 研究高糖对大鼠肾间质成纤维细胞(NRK49F)表达 PINC H-1(Particulary interesting new cysteine-histicline rich protein-1)和整合素连接激酶(Integrin-linked kinase,IL K)的影响,探讨PINCH-1在糖尿病肾病中的作用机制.方法(1)体外培养大鼠NRK49F细胞,分别采用高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养基培养6 h 、12 h 、24 h 、48 h 、72 h后,检测各组细胞不同时间点 PINC H-1 、ILK 、α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth M uscle Actin,α-SM A)mRN A及蛋白表达的动态变化,ELISA法检测各组细胞上清液纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagen type I,Col I)的表达.(2)采用不同浓度葡萄糖(5.5 mmol/L 、15.0 mmol/L 、25.0 mmol/L)作用于大鼠NRK49F细胞48 h后,检测各组细胞 PINC H-1 、ILK 、α-SM A mRN A 及蛋白的表达.结果(1)与低糖组相比,高糖组 PINCH-1 、ILK 、α-SMA mRNA 及蛋白的表达明显上调,高糖刺激早期呈一定时间依赖性增加,FN 、Col I蛋白的分泌水平随着高糖刺激时间的延长,呈持续升高,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).(2)不同浓度葡萄糖培养大鼠 NRK49F 细胞48 h后,PINCH-1 、ILK 、α-SM A mRNA 及蛋白的表达呈浓度依赖性增加,FN 、Col I的分泌水平随着葡萄糖浓度的增加持续升高.结论 高糖能够促进 NRK49F中调节蛋白 PINCH-1和 ILK的表达,促进肾脏成纤维细胞表型转化以及纤维化蛋白 FN 、Col I的分泌.PINC H-1可能通过与IL K相互作用,在糖尿病肾病肾间质纤维化的发生发展中发挥重要的作用.

关键词：PINCH-1蛋白、ILK、高糖、糖尿病肾病、成纤维细胞

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资助基金：2019年四川省卫生健康委员会科研课题重点研究项目19ZD006

在线出版日期：2020-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：316-321