10.3969/j.issn.1672-187X.2022.06.002
miR-145调控靶基因SENP1对前列腺癌细胞生物学行为的影响及机制
目的 分析微小RNA-145调控靶基因小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1对前列腺癌细胞生物学行为的作用机制.方法 选取对数生长期的前列腺癌细胞株PC-3细胞,分为对照组(仅细胞培养)、miR-145组(转染微小RNA-145)、SENP1组(转染小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1)、miR-145+SENP1组(转染微小RNA-145及小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1),转染48 h后,双荧光素酶报告基因检测微小RNA-145与小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1的相互作用,采用水溶性四氮唑8法测定4组细胞增殖抑制率,经细胞黏附实验测定其黏附能力,Tran-swell检测细胞侵袭与迁移能力,逆转录-聚合酶链式反应与Western-blot法检测小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1表达.结果 双荧光素酶报告基因检测显示,微小RNA-145可明显抑制小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1-野生型的荧光素酶活性(P<0.05),而对小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1-突变型的荧光素酶活性无明显抑制作用(P>0.05).miR-145组细胞增殖抑制率显著高于SENP1组、miR-145+SENP1组(P<0.05),miR-145+SENP1组细胞增殖抑制率显著高于SENP1组(P<0.05);miR-145组细胞黏附能力显著低于对照组(P<0.05),miR-145+SENP1组细胞黏附能力显著高于miR-145组(P<0.05);miR-145组细胞迁移个数显著少于对照组(P<0.05),miR-145+SENP1组细胞迁移个数显著多于miR-145组(P<0.05).逆转录-聚合酶链式反应显示,miR-145组小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1 mRNA表达显著低于对照组、SENP1组、miR-145+SENP1组(P<0.05),miR-145+SENP1组小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1 mRNA表达显著低于SENP1组,Western-blot实验结果趋势与逆转录-聚合酶链式反应一致.结论 微小RNA-145可明显抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖、黏附、侵袭与迁移,这一作用可能通过靶向调控小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1实现.
微小RNA-145、特异性蛋白酶1、前列腺癌、细胞生物学行为
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R737.25(肿瘤学)
河南省科技攻关计划项目182102310536
2022-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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