miR-125a-5p靶向MEIS2基因对垂体瘤AtT20细胞增殖、凋亡的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)是否可靶向调控MEIS2基因表达并分析其对垂体瘤AtT20细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AtT20细胞及小鼠正常垂体细胞(NPC)中miR-125a-5p及MEIS2 mRNA表达量.采用瞬时转染技术分别将miR-125a-5p mimic质粒、anti-miR-125a-5p抑制剂及si-MEIS2质粒转染至AtT20细胞.双荧光素酶报告基因检测miR-125a-5p与MEIS2的靶基因关系,同时共转染miR-125a-5p mimic与pcDNA-MEIS2验证miR-125a6p是否通过靶向MEIS2表达发挥作用.MTT法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测各组细胞MEIS2蛋白表达.结果 qRT-PCR检测结果显示,与NPC比较,miR-125a-5p在AtT20细胞中表达水平显著降低,MEIS2 mRNA表达水平显著升高;与miR-NC组比较,miR-125a-5p组miR-125a-5p表达水平显著升高.Western blotting检测结果显示,与NPC比较,AtT20细胞中MEIS2蛋白表达水平显著升高;与si-NC组比较,si-MEIS2组MEIS2蛋白表达水平显著降低;与miR-125a-5p+ pcDNA组比较,miR-125a-5p+ pcDNA-MEIS2组MEIS2蛋白表达水平显著升高.双荧光素酶报告基因验证结果显示miR-125a-5p可直接调控MEIS2基因表达.MTT检测结果显示,与miR-NC组比较,miR-125a-5p组细胞增殖能力显著降低,抑制MEIS2表达细胞增殖能力显著降低;与miR-125a-5p+ pcDNA组相比,miR-125a-5p+ pcDNA-MEIS2组细胞增殖能力显著升高.流式细胞术检测结果均与MTT检测结果呈反向关系.结论 miR-125a-5p通过负向调控MEIS2进而抑制垂体瘤AtT20细胞增殖能力并促进细胞凋亡.

关键词：垂体瘤;微小RNA-125a-5p;MEIS2;增殖;凋亡

所属期刊栏目：19

分类号：R739.41(肿瘤学)

在线出版日期：2022-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：64-69