星形胶质细胞重编程诱导为神经细胞的实验研究

摘要：

目的 研究在体外星形胶质细胞重编程诱导为神经细胞的方法.方法 在体外培养出生1～4d大鼠幼仔皮层脑组织来源的星形胶质细胞.在24孔板中将提纯、鉴定过的第三代星形胶质细胞培养在聚D-赖氨酸涂层的盖玻片上,并分为诱导组与对照两组.诱导组:将Y-27632(0.5μmol/L)、VPA(0.5 μ.mol/L)、SB431542 (94 nmol/L)、RepSox(25 μmol/L)这4种小分子溶入二甲基亚砜(DMSO),再加入培养基中,最终达到0.5 μmol/L,0.5 μmol/L,94 nmol/L,25 μmol/L的终浓度,孵育星形胶质细胞7d;对照组:加入相同体积的DMSO.诱导组细胞使用小分子物质孵育7d后,更换含有生长因子BDNF、NT-3的神经元培养基培养14 d,对照组细胞于7d后,更换同样含有生长因子BDNF、NT-3的神经元培养基培养14 d.14 d后光镜下观察各组细胞的形态变化;并采用细胞免疫荧光检测神经元标志物TUJ1、MAP2及NeuN的表达.结果 诱导组星形胶质细胞经过小分子物质重编程诱导7d并加入神经元培养基14 d后,光镜下观察发现大部分细胞形态发生改变,饱满的胞质变得细长,有多个突起伸出且突起较长;免疫荧光检测示,神经元标志物TUJ1、MAP2及NeuN表达阳性细胞的比例(15.6％±0.7％)明显高于对照组(3.2％±0.3％),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 小分子化合物Y-27632、VPA、SB431542、RepSox可以将星形胶质细胞直接重编程诱导为神经细胞.

关键词：小分子物质、星形胶质细胞、神经细胞、重编程

所属期刊栏目：18

分类号：R739.41(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省科教强卫工程医学重点人才研究基金

在线出版日期：2021-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：305-309