10.3969/j.issn.1672-7770.2017.01.008
重编程人成纤维细胞为诱导型类小脑颗粒样细胞的体外实验研究
目的:在体外直接诱导重编程获取患者成纤维细胞来源的诱导型类小脑颗粒样细胞(hiCGCs),并研究这些细胞的生物学特征。方法筛选与小脑神经细胞发育、分化相关的诱导因子;构建携带有转录因子的表达载体;以标准皮肤细胞培养流程培养出人头皮成纤维细胞,使用慢病毒载体介导Ascl1、Sox2和OCT4三个转录因子在胞内表达,并在培养过程中加入神经营养因子:BMP4,FGF8b和Wnt3a;诱导获得具有小脑颗粒神经元特征的hiCGCs。结果经细胞免疫组织化学和电生理检测,证实该hiCGCs具有类似正常小脑颗粒神经元的生物学和生理学特征。使用Ascl1、Sox2和OCT4三个转录因子及BMP4、FGF8b和Wnt3a三种营养因子可将成人成纤维细胞直接转变成为具有小脑颗粒神经元特征的hiCGCs。结论 HiCGCs在形态上与小脑颗粒神经元非常相似,能够表达小脑颗粒神经元的特异性蛋白,并具有类似正常小脑颗粒神经元的电生理特性。
人诱导型类小脑颗粒样神经细胞、再生医学、谱系重编程
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R394.2;Q421
国家自然科学基金81471242
2017-03-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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