凝血酶激活小胶质细胞的时间及浓度依赖性研究
目的:用不同浓度的凝血酶在设定时间内刺激小胶质细胞,确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳浓度.再以最佳浓度分别作用不同时间,以探讨该浓度凝血酶作用小胶质细胞激活的最佳时间.方法:体外培养小胶质细胞N9,分为正常对照组、凝血酶5 U/mL组、10 U/mL组、15 U/mL组、20 U/mL组、25 U/mL组、30 U/mL组,作用时间为6h,用ELLISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、Griess法检测一氧化氮(NO)含量,以确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳浓度.然后以最佳浓度分别作用于小胶质细胞3、6、12、24 h,再次用上述方法检测细胞上清液中TNF-α、NO含量,确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳时间.结果:凝血酶浓度为5 U/mL时,TNF-α含量与正常对照组比较差异无统计学意义(P=0.632),凝血酶浓度在10～20 U/mL时,TNF-α含量随凝血酶剂量增加而逐渐升高,20 U/mL时TNF-α的含量达到最高(P＜0.001).不同浓度凝血酶刺激组,细胞上清液中NO含量比较,组间差异有统计学意义(f=365.819,P＜0.001).凝血酶浓度为5 U/mL时,NO的含量为4.44(±0.12)μmol,与正常对照组比较差异有统计学意义(P=0.018),且NO含量随着凝血酶浓度增加而升高,各组与正常对照组比较差异均有显著意义(P＜0.001).结论:凝血酶诱导小胶质细胞激活的最佳浓度为20 U/mL,最佳时间为12h.
小胶质细胞、凝血酶、肿瘤坏死因子(TNF-α)、一氧化氮(NO)
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R95-33;R954.6-33+2(药事组织)
国家自然科学基金资助项目81460185/H906;贵州省科学技术基金资助项目黔科合J字20132043号
2019-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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