清热凉血方药抑制c-Jun氨基末端激酶2丝裂原活化蛋白激酶信号通路并下调角质形成细胞人β防御素-2的研究

摘要：

目的:通过研究清热凉血中药对人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)人β防御素(HBD)-2的表达及信号通路的调控作用,探讨其治疗银屑病的可能机制.方法:用白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的混合物刺激HaCaT细胞建立信号通路活化及HBD-2高表达的HaCaT细胞模型;分别用清热凉血中药、维A酸和生理盐水进行干预,用实时荧光定量核酸扩增法(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定清热凉血中药对细胞模型中HBD-2表达水平的影响;用免疫印迹法(westen blot)检测清热凉血中药对细胞模型中HBD-2及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)和核转录因子kappa B(NF-KB)信号通路的影响.结果:①中药血清高剂量组和维A酸血清组均可明显下调HaCaT细胞模型中HBD-2mRNA的表达,抑制率分别为66.8％和73.5％,与细胞模型组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01),中药血清高剂量组和维A酸血清组比较差异无统计学意义(P＞0.05);②中药血清高剂量组与维A酸血清组均可抑制细胞培养上清中HBD-2的分泌,与细胞模型组比较,抑制率分别为35.6％和61.6％;③100 mg/L的IL-1β和TNF-α混合物作用18h后可使HaCaT细胞中的c-Jun氨基末端激酶(JNK)2 MAPK信号通路活化;清热凉血中药血清可以明显下调磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)2蛋白的相对含量,抑制JNK2 MAPK信号通路的活化.结论:清热凉血方药可明显下调HBD-2高表达的HaCaT细胞模型及培养上清中HBD-2的表达.清热凉血方药可以抑制JNK2 MAPK信号通路,并阻断IL-1β和TNF-α对HBD-2的激活.

关键词：银屑病、MAP激酶信号系统、NF-κB、β防御素、清热凉血方药

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分类号：R758.63;R285(皮肤病学与性病学)

在线出版日期：2016-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：625-629