艾司氯胺酮通过调控miR-148a-3p/KLF4通路减轻脊髓损伤大鼠的炎症反应
目的 通过构建脊髓损伤大鼠模型,探讨艾司氯胺酮对脊髓损伤和微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)/Kruppel样因子4(KLF4)通路的影响.方法 选择SPF级成年雌性SD大鼠48只,7～9周龄,体重215～255 g.将大鼠随机分为四组:假手术组(S组)、脊髓损伤组(SCI组)、艾司氯胺酮50 mg/kg组(E组)和艾司氯胺酮50 mg/kg+miR-148a-3p抑制剂5 mg/kg组(EI组),每组12只.S组予去除椎板处理,SCI组仅建立脊髓损伤大鼠模型,E组和EI组分别于建模后每日腹腔注射艾司氯胺酮50 mg/kg和艾司氯胺酮50 mg/kg+miR-148a-3p抑制剂5 mg/kg,连续注射7 d.于建模后1、4、7、10 d采用斜板实验计算最大倾斜角度、行为学实验计算运动功能BBB评分评估大鼠脊髓神经功能.建模后10 d BBB评分后处死大鼠,采用ELISA法检测脊髓白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)浓度,qPCR法检测脊髓miR-148a-3p、KLF4 mRNA表达量,Western blot法检测脊髓神经元核抗原(NeuN)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、KLF4蛋白含量,HE染色法观察损伤处脊髓病理情况.结果 与S组比较,SCI组、E组和EI组建模后1、4、7、10 d最大倾斜角度明显减小、BBB评分明显降低,脊髓IL-1β 和MDA浓度、miR-148a-3p和KLF4 mRNA表达量、GFAP和KLF4蛋白含量明显升高,脊髓SOD浓度、NeuN蛋白含量明显降低(P<0.05).与SCI组比较,E组和EI组建模后4、7、10 d最大倾斜角度明显增大、BBB评分明显升高,脊髓IL-1β和MDA浓度、GFAP蛋白含量明显降低,脊髓SOD浓度、miR-148a-3p和KLF4 mRNA表达量、NeuN和KLF4蛋白含量明显升高(P<0.05).与E组比较,EI组建模后4、7、10 d最大倾斜角度明显减小、BBB评分明显降低,脊髓IL-1β和MDA浓度、GFAP蛋白含量明显升高,脊髓SOD浓度、miR-148a-3p和KLF4 mRNA表达量明显降低(P<0.05).S组脊髓结构完整,细胞间排列紧密;SCI组脊髓结构被破坏,产生多个空洞;E组脊髓结构逐渐恢复,细胞排列较为整齐,空洞数量明显减少;EI组脊髓结构恢复较慢,细胞排列较为松散,仍有少量空洞.结论 艾司氯胺酮通过调控miR-148a-3p/KLF4通路,抑制氧化应激反应和炎症反应,升高脊髓miR-148a-3p、KLF4 mRNA表达量和NeuN和KLF4蛋白含量,改善大鼠行为学和脊髓神经功能,保护神经组织和脊髓结构,减缓脊髓损伤.
脊髓损伤、艾司氯胺酮、微小RNA-148a-3p、Kruppel样因子4、神经功能
38
R737.9;S816.7;R651.2
武汉市卫生健康委员会医学科研项目WX21B10
2022-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
965-970
