miR-548d-5p通过TLR2/Myd88/NF-κB信号通路促进牙周膜干细胞细胞增殖和成骨分化的研究

摘要：

目的:探讨TLR2 负性上游调节因子miR-548d-5p对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)增殖和成骨分化的影响及作用机制.方法:构建TLR2 过表达载体TLR2 OE.TLR2 OE和miR-548d-5p模拟物miR-548d-5p mimic 分别转染 hPDLSCs,RT-qPCR 评估转染效率.CCK-8 法和细胞克隆形成实验检测hPDLSCs增殖能力.茜素红染色和蛋白免疫印迹检测OCN蛋白表达水平,评价其成骨分化能力.蛋白免疫印迹测定TLR2/MyD88/NF-κB信号通路分子Myd88 和NF-κB表达水平.结果:转染TLR2 OE可显著降低hPDLSCs细胞存活率和克隆形成数目(P＜0.05),显著降低hPDLSCs矿化结节形成数量和OCN蛋白表达水平(P＜0.05),同时显著增加hPDLSCs Myd88 和NF-κB分子表达水平(P＜0.05).转染miR-548d-5p mimic,可显著增加hPDLSCs细胞存活率和克隆形成数目(P＜0.05),显著增加hPDLSCs矿化结节形成数量和OCN蛋白表达水平(P＜0.05),同时显著降低hPDLSCs Myd88 和 NF-κB 分子表达水平(P＜0.05).与空白组相比,TLR2 OE 和 miR-548d-5p mimic 共转染后,hPDLSCs存活率和克隆形成数目无显著性差异,hPDLSCs矿化结节形成数量和OCN蛋白表达水平,及Myd88 和NF-κB分子表达水平均无显著性差异.结论:TLR2 抑制hPDLSCs的增殖和成骨分化,miR-548d-5p则增强hPDLSCs的增殖和成骨分化.miR-548d-5p可拮抗TLR2 过表达对hPDLSCs增殖和成骨分化的影响.miR-548d-5p通过TLR2/Myd88/NF-κB信号通路调节牙周膜干细胞的细胞增殖和成骨分化.

关键词：Toll样受体2、牙周膜干细胞、miRNA

所属期刊栏目：40

分类号：Q813.1(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：8-12