lncRNA GAS5靶向miR-103影响人牙髓干细胞向成牙骨质分化的作用

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异性转录本5(GAS5)靶向miR-103对人牙髓干细胞(hDPSCs)向成牙骨质分化的影响.方法:从成人第三磨牙中分离培养hDPSCs,倒置光学显微镜观察P3代hDPSCs形态,流式细胞术检测hDPSCs表面抗原CD73、CD90、CD105、CD34表达情况.将hDPSCs分为Ct组、si-NC组、si-GAS5组、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+mimic NC组、pcDNA-GAS5+miR-103mimic组,qRT-PCR检测hDPSCs中GAS5、miR-103表达;CCK-8法检测hDPSCs增殖能力;取经成牙骨质分化培养基诱导7 d后的hDPSCs,Western blot检测成牙骨质细胞标志蛋白牙骨质附着蛋白(CAP)、牙骨质蛋白1(CEMP1)、骨钙素(OCN)的表达,茜素红S染色检测矿化结节形成;双荧光素酶报告基因实验验证GAS5与miR-103的关系.结果:P3代hDPSCs生长状态佳,细胞呈漩涡状或放射状排列.P3代hDPSCs高表达CD73(99.05％)、CD90(98.27％)、CD105(97.88％),低表达CD34(2.02％),证明成功分离出hDPSCs.与Ct组、si-NC组比较,si-GAS5组hDPSCs中GAS5表达、OD450nm值(3 d、5 d)、CAP、CEMP1、OCN蛋白表达、矿化结节形成率降低,miR-103表达升高(P<0.05);与Ct组、pcDNA组比较,pcDNA-GAS5组hDPSCs中GAS5表达、、OD450 nm值(3 d、5 d)、CAP、CEMP1、OCN蛋白表达、矿化结节形成率升高,miR-103表达降低(P<0.05);与pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+mimic NC组比较,pcDNA-GAS5+miR-103mimic组hDPSCs中GAS5表达变化差异不显著(P>0.05),OD450nm值(3 d、5 d)、CAP、CEMP1、OCN蛋白表达、矿化结节形成率降低,miR-103表达升高(P<0.05).结论:过表达GAS5可能通过下调miR-103促进hDPSCs向成牙骨质分化.

关键词：生长停滞特异性转录本5、miR-103、牙髓干细胞、成牙骨质分化

所属期刊栏目：39

分类号：R781(口腔科学)

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：273-278