双链RNA依赖的蛋白激酶在放射性肺损伤中的作用及机制研究

摘要：

目的:探讨双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)在放射性肺损伤中的作用和分子机制.方法:将20只雄性SD大鼠随机分成对照组和放射组,对照组不做任何处理,放射组大鼠左肺一次性给予20 Gy照射,观察1个月.人肺泡上皮细胞(HPAEpiC)分别转染高、低表达的PKR后,给予15 Gy照射.采用支气管肺泡灌洗液的分析、Masson染色、免疫组织化学、MTT法、Real-time PCR和Western blot等方法研究PKR在放射性肺损伤中的作用及机制.结果:与对照组比较,放射组大鼠体重明显较低,肺/体重比值明显较高(P＜0.05);通过ELISA检测发现,放射组大鼠肺组织中促炎因子IL-1β和TNF-α相对表达水平显著高于对照组,而抑炎因子IL-10相对表达水平则明显低于对照组(P＜0.05);Masson染色结果表明,放射组大鼠肺间隔纤维组织沉积显著高于对照组(P＜0.05);放射组肺组织TUNEL阳性细胞及促凋亡因子Bax、Caspase-3的mRNA和蛋白水平明显高于对照组,且抗凋亡因子Bcl-2 mRNA和蛋白水平显著低于对照组(P＜0.05);放射组大鼠肺组织PKR蛋白表达水平明显低于对照组,而p-PKR蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.05);实验结果表明,PKR敲低细胞照射组细胞生存率、PKR蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达显著低于正常细胞照射组,而促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达显著高于正常细胞照射组(P＜0.05);PKR过表达细胞照射组细胞生存率、PKR蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达显著高于正常细胞照射组,而促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达显著低于正常细胞照射组(P＜0.05).结论:放射可以导致严重的肺损伤,肺损伤发生机制可能与PKR通路有关.

关键词：放射、肺损伤、凋亡、双链RNA依赖的蛋白激酶

所属期刊栏目：16

分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：2012年全军“十二五”面上项目No:CSY12J002;2013年全军“十二五”面上项目No:CSY13J002;2014年总后卫生部重大新上No:AWS14L008

在线出版日期：2015-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：672-677