10.13201/j.issn.1009-5918.2014.07.002
肠三叶因子介导PI3K/Akt信号通路保护胃黏膜上皮细胞紧密连接
目的:探讨肠三叶因子对胃黏膜上皮细胞紧密连接的保护作用,并研究PI3K/Akt信号通路在其中的作用机制.方法:体外培养GES-1细胞,分别设正常对照组,LPS组,ITF组,LPS+ ITF组,LPS+ ITF+LY294002组,ITF+ LY294002组.正常对照组:正常培养;LPS组:加入浓度为10 mg/L的LPS; ITF组:加入浓度为100 μg/L的ITF; LPS+ ITF组:加入浓度为10 mg/L的LPS,同时加入100 μg/L的ITF; LPS+ ITF+LY294002组:加入浓度为10 mg/L的LPS、100 μg/L的ITF,同时加入PI3K/Akt信号通路的抑制剂LY294002(15 μM);ITF+ LY294002组:加入100 μg/L的ITF,同时加入15 μM的LY294002.培养48 h,采用Westernblot检测ITF对PI3K/Akt信号通路的作用,采用免疫荧光和Western blot检测细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的变化情况.结果:Western blot检测结果说明,与对照组相比,ITF提高了pAkt蛋白的表达水平,而LY294002抑制了ITF激活的pAkt蛋白的表达,说明ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来调控GES-1细胞的生理活动.免疫荧光和Western blot结果显示LPS导致GES-1细胞的紧密连接遭到破坏,降低紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达水平,而ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来保护GES-1细胞的紧密连接的完整性.结论:ITF保护胃黏膜上皮细胞紧密连接的完整性,提高紧密连接蛋白的表达水平,其发挥作用的主要分子机制是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的.
GES-1细胞、肠三叶因子、紧密连接、PI3K/Akt信号通路
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R573(消化系及腹部疾病)
南京军区重点课题No:12Z32,南京军区南京总医院青年基金课题No:2014004
2014-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
379-382,386