柱前衍生反相高效液相色谱法测定田菁种子水解液中的单糖

摘要：

建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱法,测定田菁种子酶水解液中的甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖等4种单糖,用以实现酶法制备半乳甘露低聚糖的定量测定.采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)对酶水解液中的单糖进行柱前衍生化,考察不同色谱分析条件和衍生化条件对单糖衍生物峰面积的影响,利用反相高效液相色谱法分析酶水解液中的4种单糖.结果表明:当流动相为乙腈/磷酸二氢钾缓冲溶液(0.02 mol/L,pH值6.5),衍生化条件为PMP用量150μL、反应时间80 min、反应温度60℃和三氯甲烷萃取3次时,各单糖组分的峰面积较大、分离效果较好;方法学考察结果发现:4种单糖组分标准曲线的R2均大于0.9994,加标回收率为96.9％ ～104.8％,相对标准偏差(RSD)小于0.56％,重复性、稳定性和精密度实验结果良好,说明该实验条件下建立的方法有效可信.同时,田菁种子酶水解液中组成半乳甘露聚糖的甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖等4种单糖的物质的量之比为1:0.44:1.92:0.53.柱前衍生化高效液相色谱法为分析田菁种子酶水解液中单糖组成和含量提供了一种操作简单、准确、分离度高、重现性好的定量方法.

关键词：田菁种子、半乳甘露聚糖、甘露低聚糖、水解、单糖

所属期刊栏目：40

分类号：TQ35;O657.7

资助基金：国家林业公益性行业科研专项201404615

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：31-38