10.3969/j.issn.1671-4695.2023.10.002
lncRNA HOTAIR靶向miR-520h对骨髓瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)对骨髓瘤细胞H929增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法 回顾性收集2019年1月至2021年12月临沂市肿瘤医院收治的多发性骨髓瘤(MM)患者30例作为MM组,另取同期行骨髓穿刺并最后确认无骨髓功能障碍的健康者30例作为对照组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析骨髓瘤组织和正常组织中HOTAIR和miR-520h表达水平.体外培养H929细胞,分为 si-NC 组(转染 si-NC)、si-HOTAIR 组(转染 si-HOTAIR)、miR-NC 组(转染 miR-NC)、miR-520h 组(转染miR-520h mimics)、si-HOTAIR+anti-miR-NC 组(si-HOTAIR 与 anti-miR-NC 共转染)、si-HOTAIR+anti-miR-520h组(si-HOTAIR与anti-miR-520h共转染).细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力;Transwell实验分析细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)表达;双荧光素酶实验验证HOTAIR与miR-520h的靶向关系.结果 与对照组比较,MM组患者骨髓瘤组织中HOTAIR表达升高,miR-520h表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与si-NC组比较,si-HOTAIR组HOTAIR、H929 细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白水平均降低,miR-520h、凋亡率、p21和Bax蛋白水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-520h组H929细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白水平均降低,miR-520h、凋亡率、p21和Bax蛋白水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与si-HOTAIR+anti-miR-NC 组比较,si-HOTAIR+anti-miR-520h 组 H929 细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白水平均升高,miR-520h、凋亡率、p21和Bax蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).HOTAIR靶向miR-520h并负调控其表达.结论 沉默lncRNA HOTAIR通过靶向miR-520h能够抑制骨髓瘤细胞H929增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡.
lncRNA HOTAIR、骨髓瘤、miR-520h、增殖、迁移侵袭、凋亡
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R735.2;R285.5;R31
山东省医学科研基金项目2021Y0201520
2023-07-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1013-1018