LncRNA NEAT1在动脉粥样硬化大鼠模型中调节血管平滑肌细胞发育的机制

摘要：

目的 探究LncRNA NEAT1在动脉粥样硬化大鼠模型中调节血管平滑肌细胞发育的机制.方法 将7周雄性SPF级ApoE-/-及其同窝野生型30只SD大鼠按照随机数字表法分为3组,每组10只.正常对照组(野生SD大鼠饲喂标准实验室饮食18周);AS组(ApoE-/-大鼠饲喂高脂饮食8周后,连续10周腹腔注射100μL shNC);sh-NEAT1组(ApoE-/-大鼠在高脂饮食喂养8周后,连续10周腹腔注射100μL sh-NEAT1).通过qRT-PCR检测NEAT1 mRNA表达.通过油红O染色检测ApoE-/-大鼠AS斑块的数量和大小.通过MTT和流式细胞术分别检测VSMC细胞活力和细胞凋亡.通过蛋白质印迹分析检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、p-NF-κB和p-p38 MAPK的表达.通过ELISA检测ApoE-/-大鼠炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)]水平.通过免疫组织化学检测ApoE-/-大鼠[血管细胞粘附分子1(VCAM-1)、黏附分子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)]表达.结果(1)与正常对照组相比,AS模型组NEAT1 mRNA表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组NEAT1 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).(2)与正常对照组相比,AS模型组斑块显著增大,差异有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组斑块减小,差异有统计学意义(P<0.05).(3)与正常对照组相比,AS模型组细胞活力增加,细胞凋亡降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组细胞活力降低,细胞凋亡增加,差异均有统计学意义(P<0.05).(4)与正常对照组相比,AS模型组Bcl-2表达增加,Bax和Caspase-3的表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组Bcl-2表达降低,Bax和Caspase-3的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).(5)与正常对照组相比,AS模型组TNF-α、IL-1β和IL-6水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05).(6)与正常对照组相比,AS模型组VCAM-1、ICAM-1和MCP-1阳性面积占比均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组VCAM-1、ICAM-1和MCP-1阳性面积占比均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).(7)与正常对照组相比,AS模型组p-NF-κB和p-p38 MAPK的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与AS模型组相比,sh-NEAT1组p-NF-κB和p-p38 MAPK的表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LncRNA NEAT1在ApoE-/-高脂饮食诱导的AS大鼠中高表达,沉默NEAT1通过抑制MAPK/NF-κB通路激活,抑制VSMC活力和增殖,促进细胞凋亡,减轻炎症反应水平,从而抑制AS进展.

关键词：大鼠、LncRNA NEAT1、动脉粥样硬化、血管平滑肌细胞、凋亡

所属期刊栏目：21

分类号：R735.7;R541.4;R684.1

资助基金：陕西省重点研发计划项目2018SF-130

在线出版日期：2022-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1125-1130