10.3969/j.issn.1671-4695.2021.17.002
黑参煎剂对ApoE基因敲除小鼠下肢动脉缺血后血管生成的影响研究
目的 探讨黑参煎剂对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠下肢动脉缺血后血管生成的影响.方法 4周龄雄性ApoE基因敲除小鼠84只和4周龄雄性C57野生小鼠42只,分别以高脂饮食和正常饲料喂养.饲养4周后,ApoE基因敲除小鼠进行右下肢肢动脉结扎缩窄,形成下肢动脉慢性缺血模型,模型成功后,随机数字表法分为对照组和实验组,每组42只.C57野生小鼠只切开并分离动静脉后缝合,不结扎缩窄,作为空白组.实验组连续28 d给予黑参煎剂灌胃,每日1次,对照组和空白组均取等量生理盐水灌胃,末次给药后2h对所有小鼠进行右下肢外观缺血评分;于术前,术后即时、7、14、21、28 d测定小鼠后肢多普勒血流变化情况.末次给药2 h后,测定小鼠凝血时间.检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)含量.取小鼠后肢动脉,甲醛固定后进行苏木精-伊红染色后,对不同切面斑块形成情况进行观察对比.取小鼠右下肢余下部分动脉血管,蛋白质免疫印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)及CD31蛋白表达情况.结果 实验组和空白组右后肢外观评分[(1.67±0.25)、(0.61±0.02)分]明显低于对照组[(3.23±0.40)分],差异有统计学意义(P<0.05).实验组小鼠术后14 d,右后肢血流灌注逐渐恢复.实验组小鼠凝血时间[(406.91±75.82)s]显著高于对照组和空白组[(320.83±55.08)、(316.29±47.65)s],差异有统计学意义(P<0.05).实验组TC、LDL-C、TG水平[(12.39±2.27)、(2.45±0.63)、(9.37±2.04)mmol/L]明显低于对照组[(30.56±6.03)、(3.12±0.67)、(18.28±4.19)mmol/L],HDL-C[(0.47±0.20)mmol/L]明显高于对照组[(0.26±0.13)mmol/L],差异有统计学意义(P<0.05).苏木精-伊红染色结果显示,实验组右下肢动脉斑块少于对照组.实验组右下肢动脉血管中VEGF、CD31表达量(0.67±0.09、0.45±0.03)高于对照组(0.31±0.05、0.34±0.03)和空白组(0.36±0.06、0.40±0.08),差异有统计学意义(P<0.05).结论 ApoE基因敲除小鼠下肢动脉缺血模型中,黑参煎剂可以改善小鼠下肢动脉缺血情况,延长小鼠凝血时间,降低小鼠血液中TC、LDL-C、TG含量,减少动脉斑块形成,促进VEGF、CD31表达,促进小鼠动脉缺血后的血管生成.
小鼠;动脉粥样硬化;载脂蛋白E;基因敲除;黑参;血栓
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辽宁省自然科学基金项目编号:20180550302
2021-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1797-1800