MAPK与PI3K-AKT-mTOR通路双重抑制对去势抵抗性前列腺癌的作用机制研究

摘要：

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)与磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-AKT-mTOR)通路双重抑制对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的作用机制.方法 采用Western blot检测细胞中前列腺癌细胞(DU145和LNCaP)的细胞外信号调节激酶5(ERK5)、mTOR含量.应用RNA干扰(RNAi)技术建立基因降表达细胞模型,分别建立ERK5降表达、mTOR降表达、ERK5和mTOR同时降表达细胞模型.MTT法检测不同基因降表达对前列腺癌细胞的增殖的影响.比较CYP17A1在mTOR降表达DU145细胞和正常细胞中的表达.MTT法检测分别加入mTOR抑制剂(替西罗莫司)和CYP17A1抑制剂(阿比特龙)的DU145细胞的抑制率.采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定ERK5和mTOR在前列腺癌、前列腺增生和CRPC组织中的表达.结果 mTOR蛋白在DU145细胞中的表达显著高于LNCaP细胞(P＜0.05).ERK5降表达组、mTOR降表达组、ERK5+ mTOR降表达组的LNCaP细胞的增殖未受显著抑制(P＞0.05).mTOR降表达组、ERK5+ mTOR降表达组的DU145细胞抑制率显著高于ERK5降表达组(P＜0.05).CYP17A1在mTOR降表达DU145细胞中的表达显著低于正常DU145细胞,且呈剂量依赖(P＜0.05).替西罗莫司1 μmol/L+阿比特龙0.5μmol/L组的DU145细胞抑制率显著高于单用替西罗莫司组和单用阿比特龙组(P＜0.05).ERK5和mTOR在前列腺癌和CRPC组织中均高表达,mTOR在CRPC组中的表达水平显著高于前列腺增生组和前列腺癌组(P＜0.05).结论 mTOR蛋白在DU145细胞中、CRPC组织中表达显著高于ERK5,mTOR降表达能显著抑制DU145细胞增殖.提示CRPC以PI3K-Akt-mTOR通路高表达为主,mTOR对DU145细胞的抑制作用与其对CYP17A1的抑制作用有关,mTOR联合CYP17A1的抑制作用优于mTOR或CYP17A1的单独抑制.

关键词：去势抵抗性前列腺癌、DU145细胞、LNCaP细胞、丝裂原活化蛋白激酶、细胞外信号调节激酶5、磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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资助基金：上海卫计委面上项目201540081

在线出版日期：2019-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2296-2299