miRNA-375对宫颈癌细胞系SiHa增殖能力和迁移能力的影响及相关机制研究

摘要：

目的 研究微小RNA-375(miR-375)对宫颈癌细胞系SiHa增殖能力和迁移能力的影响及相关机制.方法 收集宫颈癌细胞系SiHa,将细胞随机分为A组(转染对照抑制剂)、B组(转染对照模拟基因)、C组(转染miR-375抑制剂)、D组(转染miR-375模拟基因).通过实时荧光定量PCR法对SiHa细胞中miR-375的表达水平进行检测,并用免疫蛋白印迹法对磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位 α(PIK3CA)蛋白的表达水平进行检测;采用MTT法对SiHa增殖活性进行检测,并用划痕实验对细胞迁移能力进行检测;采用双荧光素酶报告基因实验对miR-375与PIK3CA的靶向关系进行验证.结果 采用生物学信息软件检测结果发现,miR-375与PIK3CA 3'-UTR存在结合位点.双荧光素酶报告基因检测结果可见,miR-375模拟基因+PIK3CA-Mut共转染组荧光素酶活性与对照模拟基因+PIK3CA-Mut共转染组比较,并无显著差异(P>0.05);而相比对照模拟基因+PIK3CA-WT共转染组,共转染miRNA模拟基因和PIK3CA-WT后细胞荧光活性明显下降(P<0.05).相比A组,C组SiHa细胞中miR-375的相对表达量明显下降(P<0.05);相比B组,D组SiHa细胞中miR-375的相对表达量明显增高(P<0.05).经免疫蛋白印迹法检测结果可见,相比A组,C组SiHa细胞中PIK3CA蛋白的表达水平明显增高(P<0.05);相比B组,D组PIK3CA蛋白的表达水平明显下降(P<0.05).细胞培养后1 d、2 d、3 d,相比A组,C组SiHa细胞增殖活性明显升高(P<0.05);相比B组,D组SiHa细胞增殖活性明显下降(P<0.05).划痕实验结果可见,相比A组,C组SiHa细胞迁移能力明显增强(P<0.05);相比B组,D组SiHa细胞迁移能力明显减弱(P<0.05).结论 miR-375具有阻滞宫颈癌细胞增殖和迁移的作用,其作用机制可能与靶向调控PIK3CA密切相关.

关键词：宫颈癌、微小、RNA-375、磷脂酰肌醇激酶-3、催化亚单位α、细胞增殖、细胞迁移

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资助基金：秦皇岛市科学技术研究与发展计划项目201502A204

在线出版日期：2019-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1739-1743