下调miR-19b靶向TP53INP1对骨肉瘤细胞侵袭迁移和凋亡的影响

摘要：

目的 研究miR-19b靶向调控TP53INP1对骨肉瘤细胞侵袭迁移和凋亡的影响.方法 将骨肉瘤MG63细胞分为:对照组、抑制物阴性对照组(转染抑制物阴性对照)、miR-19b抑制物组(转染miR-19b抑制物)、siRNA阴性对照+miR-19b抑制物组(转染siRNA阴性对照和miR-19b抑制物)、TP53INP1 siRNA+miR-19b抑制物组(转染TP53INP1 siRNA和miR-19b抑制物)、模拟物阴性对照组(转染模拟物阴性对照)、miR-19b模拟物组(转染miR-19b模拟物).以qRT-PCR测定转染效果,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,流式细胞术测定细胞凋亡.靶基因预测软件预测TP53INP1为miR-19b的靶基因,双荧光素酶报告载体鉴定靶向关系.以Western blot测定上调或下调miR-19b对TP53INP1表达的影响.以miR-19b抑制物和TP53INP1 siRNA共转染至MG63细胞中,以流式细胞术和Tran-swell小室测定细胞凋亡和侵袭迁移变化.结果 miR-19b抑制物MG63细胞中miR-19b表达水平下降,侵袭和迁移能力下降,细胞凋亡率升高,与对照组、抑制物阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).miR-19b与TP53INP1 mRNA的3,UTR有结合位点,荧光素酶报告载体鉴定TP53INP1为miR-19b的靶基因.与抑制物阴性对照组比较,miR-19b抑制物组上调细胞中TP53INP1蛋白表达水平,与模拟物阴性对照组比较,miR-19b模拟物组下调细胞中蛋白表达水平.与siRNA阴性对照+miR-19b抑制物组比较,TP53INP1 siRNA+miR-19b抑制物组能够上调MG63细胞的侵袭和迁移能力并减少细胞凋亡(P<0.05).结论 下调miR-19b通过靶向调控TP53INP1可抑制骨肉瘤细胞侵袭迁移并诱导细胞凋亡.

关键词：骨肉瘤细胞、TP53INP1、miR-19b、侵袭、凋亡

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在线出版日期：2019-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：804-808