沉默SETD8基因表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用

摘要：

目的 探究siRNA下调含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(SETD8)基因表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的机制.方法 采用脂质体法将特异性针对SETD8基因的siRNA转入骨肉瘤MG-63细胞中,得到关于SETD8基因沉默表达的MG-63稳定的细胞系即实验组,将杂序siRNA用脂质体法同时转染骨肉瘤MG-63细胞,得到关于Control siRNA 的MG-63细胞系即对照组,未经转染的骨肉瘤MG-63的稳定的细胞系即空白组.以上三组细胞系通过应用细胞毒性活性检测法(CCK-8法)、平板克隆法同时检测被SETD8基因沉默后骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力,侵袭迁移小室即(Transwell小室)法检测骨肉瘤MG-63细胞的侵袭和迁移能力,实时荧光定量法即(PCR法)以及蛋白质印迹法即(Western Blot法)检测SETD8基因沉默表达效果及细胞内SETD8,β- catenin,cyclinD1,vimentin、MMP3 的mRNA和相应蛋白的表达水平.结果 SETD8 siRNA转染后,骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力显著低于对照组(control siRNA转染MG-63细胞)和空白组(未经转染的MG-63细胞)(P ＜ 0.05);Transwell小室结果 显示,沉默SETD8基因组的侵袭和迁移能力明显下降;实验组(SETD8 siRNA转染MG-63细胞)中SETD8、β - catenin、cyclinD1、vimentin、MMP3 的mRNA 及蛋白表达水平显著低于阴性对照组和空白对照组(P ＜ 0.05).结论 siRNA下调SETD8基因表达可以抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖、侵袭和迁移能力,Wnt/β - catenin信号通路可能参与并调控这一过程.

关键词：骨肉瘤、SETD8、基因沉默、细胞增殖、侵袭迁移、小分子干扰

所属期刊栏目：18

资助基金：甘肃省自然资金项目2017GS10798

在线出版日期：2019-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：449-454