10.3969/j.issn.1671-4695.2019.02.012
CCL2对白血病细胞趋化作用及高表达后降低白血病细胞迁移侵袭能力的实验研究
目的 探讨趋化因子配体2(CCL2)对白血病细胞的趋化作用及高表达后降低白血病细胞迁移侵袭的能力.方法 以白血病细胞K562为研究对象,在Transwell小室的下室加入重组CCL2蛋白进行趋化,检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测重组CCL2蛋白作用后的K562细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平.K562细胞转染CCL2过表达载体,RT-PCR和Western blot检测转染效果,ELISA法检测转染后细胞培养液上清中CCL2含量.Transwell小室检测过表达CCL2的细胞迁移和侵袭能力,ELISA法检测侵袭实验Tr-answell小室上室和下室中CCL2含量.结果 Transwell小室下室中加入CCL2蛋白后K562细胞的迁移和侵袭穿膜指数分别为:2.35±0.26、2.58±0.18,均明显高于不加CCL2蛋白的K562细胞迁移和侵袭穿膜指数1.00±0.09、1.01±0.09.重组CCL2蛋白作用后K562细胞中MMP-2表达水平分别由0.26±0.12升高至0.99±0.08,MMP-9水平由0.39±0.06升高至1.18±0.13.K562细胞转染CCL2过表达载体后能够成功过表达细胞中CCL2水平,提高细胞分泌CCL2水平.过表达CCL2后的K562细胞穿膜侵袭指数从0.99±0.11降低至0.58±0.16,侵袭实验小室上室和下室中CCL2含量依次为:(900.58±69.63)ng/L、(98.84±58.64)ng/L.过表达CCL2后迁移穿膜指数无明显变化(1.02±0.14 vs.0.99±0.08).结论 CCL2能够定向趋化白血病细胞迁移和侵袭,而高表达CCL2后白血病细胞由于自分泌功能导致侵袭能力降低,作用机制可能与MMP-2和MMP-9水平有关.
白血病、趋化因子配体2、迁移、侵袭
18
2019-01-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
152-156