miR-125a对宫颈癌CaSki细胞紫杉醇化疗和放疗敏感性的影响

摘要：

目的 探讨miR-125a对宫颈癌CaSki细胞紫杉醇化疗敏感性和放疗敏感性的影响及其潜在机制.方法 Western blot检测miR-125a在正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞系CaSki、c-33A、SiHa、Hela中的表达.以宫颈癌CaSki细胞CaSki为研究对象,转染miRNA mimic建立过表达miR-125a细胞,用不同浓度(0、2.5 nM、5 nM、10 nM、20 nM、40 nM)紫杉醇处理细胞.过表达miR-125a的CaSki细胞记为miR-125a组,联合紫杉醇处理记为miR-125a+紫杉醇组,以转染miR-NC细胞为对照组,联合紫杉醇处理为紫杉醇组.MTT检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞凋亡变化.将过表达miR-125a细胞联合放射照射,细胞克隆形成实验检测放疗敏感性变化.Targetscan预测miR-125a潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验、Western blot、qPCR验证miR-125a对其靶基因Bcl-2调控作用.结果 在正常宫颈上皮细胞和CaSki、c-33A、SiHa、Hela宫颈癌细胞中miR-125a表达量分别为0.99 ± 0.08、0.20 ± 0.02、0.41 ± 0.04、0.51 ± 0.04、0.72 ± 0.03,miR-125a在宫颈癌细胞中表达明显低于正常宫颈上皮细胞.在CaSki细胞中过表达miR-125a联合紫杉醇处理能够显著抑制细胞增殖能力,其中对照组IC50为51.79 nM,miR-125a组IC50为8.01 nM.与对照组相比,miR-125a组、紫杉醇组、miR-125a联合紫杉醇组均能显著促进细胞凋亡(P ＜0.05),miR-125a联合紫杉醇组较miR-125a组、紫杉醇组细胞凋亡率明显增加(P ＜0.01).过表达miR-125a能够增加CaSki细胞对放疗的敏感性,其增敏比为1.931.Bcl-2是miR-125a的潜在靶基因,对照组与miR-125a组Bcl-2荧光素酶活性分别为0.995 ± 0.087、0.297 ± 0.032,Bcl-2蛋白表达量为0.997 ± 0.102、0.331 ± 0.044,Bcl-2 mRNA表达量为1.023 ± 0.109、0.304 ± 0.026,过表达miR-125a可显著抑制Bcl-2荧光素酶活性及蛋白和mRNA表达.结论 在宫颈癌CaS-ki细胞中miR-125a能够通过靶向抑制抗凋亡基因Bcl-2表达增加CaSki细胞对紫杉醇化疗及放疗的敏感性.

关键词：宫颈癌、miR-125a、Bcl-2、紫杉醇、放疗、敏感性

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在线出版日期：2018-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2288-2292