环介导等温扩增技术快速检测HPV18方法的建立

摘要：

目的 应用环介导等温扩增技术(LAMP)对人乳头瘤病毒18(HPV18)进行基因检测,建立一种快速、可视的HPV18核酸检测方法.方法 针对HPV18病毒特异性E6区设计LAMP检测引物,通过调整反应物浓度建立LAMP反应体系,用羟基萘酚蓝(HNB)染料对产物进行可视化判定.通过检测其他不同基因型别的病毒评估引物特异性,检测倍比稀释的临床标本确定其灵敏度,通过LAMP法检测临床标本验证其与PCR法的一致性.结果 利用LAMP方法检测到HPV18病毒E6引物的特异性好,恒温65℃条件下反应60 min即可较好完成检测.LAMP特异性好,灵敏度高,灵敏度为2.5×103拷贝/ml.LAMP可视化结果判定与PCR凝胶电泳结果相当,二者有较好的一致性(P＞0.05).结论 建立了HPV18病毒的LAMP快速、可视化检测方法,该法操作简便快捷,具有很好的开发应用前景.

关键词：人乳头瘤病毒18、环介导等温扩增法、羟基萘酚蓝

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资助基金：河北省卫生和计划生育委员会青年基金项目20120158;河北省张家口市科技计划项目12110051D

在线出版日期：2018-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1034-1037