HMGB1在多形性成胶质细胞瘤中的作用及其机制研究

摘要：

目的 研究高迁移率蛋白(HMGB1)在多形性成胶质细胞瘤(GBM)中的作用及其机制.方法 用9 L胶质瘤细胞颅内接种Wistar鼠构建同源GBM模型.建立GBM模型鼠后将其随机分为3组:GBM+Saline(n=20),GBM+Ad(n=20),GBM+Ad+Gly(n=20).10 d后对GBM+Ad组鼠进行Ad-TRAIL感染(8×107pfu/5 μl), GBM+Ad+Gly组鼠进行Ad-TRAIL感染和甘草酸(Glycyrrhizin)喂养(稀释于氢氧化钠,100 mg腹腔注射,每天两次连续喂养10 d),GBM+Saline组和对照组用生理盐水处理.采用ELISA测定体内和体外HMGB1的含量水平,TUNEL法测定细胞的凋亡,免疫细胞组化(ICC)检测HMGB1的表达.结果 HMGB1在GBM+Ad组中的血清含量为5.540±0.054 ng,显著高于GBM+saline组的0.0060±0.004 ng(p=0.0001);GBM+Ad+Gly组中HMGB1血清含量(0.07±0.016 ng)显著低于GBM+Ad组(p=0.04);GBM+saline组的HMGB1血清含量高于对照组,但差异无统计学意义(p=0.923).免疫细胞组化实验中,HMGB1在GBM-Ad组中呈高阳性表达.体外检测中,GBM+Ad组中HMGB1浓度(77.505±1.196 ng)高于GBM+saline组(8.623±0.052 ng)(p=0.0003);GBM+Ad0组中HMGB1浓度低于GBM+saline组,但差异无统计学意义(p>0.05).TUNEL法检测Ad-TRAIL感染GBM原代细胞后的细胞凋亡发现,GBM+Ad组的细胞死亡率为(78.91±0.17)%,显著高于GBM+saline组(18.29±0.73)%(p=0.04).相关性分析结果显示HMGB1含量水平与细胞死亡率呈正相关,R2=0.9976, p<0.0001.GBM+saline和GBM+Ad+Gly组鼠在第12天开始出现死亡,在第24天和第25天全部死亡;而GBM+Ad组在第16天开始出现死亡,在第40天时有50%(5/10)长期存活.结论 HMGB1在GBM治疗中高释放,且其浓度与细胞凋亡正相关.HMGB1是GBM的治疗靶点,并且是检测腺病毒治疗或免疫治疗GBM疗效的潜在生物标记.

关键词：Wistar鼠、多形性成胶质细胞瘤、高迁移率蛋白、肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体、甘草酸

所属期刊栏目：16

分类号：R73;R74

在线出版日期：2017-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1596-1600