慢病毒介导的IGF-1R基因沉默对肝细胞癌的增殖和迁移的影响

摘要：

目的 探讨慢病毒介导的胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)基因沉默对肝细胞癌的增殖和迁移的影响.方法 设计并筛选高效特异性胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)基因的小干扰RNA,构建稳定遗传的慢病毒载体质粒,观察其转染沉默IGF-1R基因的肝癌细胞株Huh7细胞增殖、迁移以及侵袭能力,进一步观察其对PI3K/Akt及Bax/Bcl-2通路的影响.结果 采用倒置相差荧光显微镜观察转染效果,镜下可见较多细胞特异性表达GFP绿色荧光,转染率超过80%.scrambled阴性对照组以及空白对照组IGF-1R mRNA及蛋白的相对表达量显著高于LV-IGF-1R-RNAi转染组(P<0.01).成功转染后,培养细胞72 h、96 h,LV-IGF-1R-RNAi转染组增值率显著低于scrambled阴性对照组以及空白对照组(P<0.05或P<0.01).侵袭实验和迁移实验均证实细胞明显受到抑制(P<0.01).蛋白免疫印迹法显示,LV-IGF-1R-RNAi转染组p-PI3K、p-Akt及Bcl-2相对表达量显著低于scrambled阴性对照组以及空白对照组(P<0.05);而Bax显著高于scrambled阴性对照组以及空白对照组(P<0.05).结论 RNAi技术沉默IGF-1R基因表达能显著抑制肝癌细胞株Huh7细胞的增殖、侵袭作用,而这一作用可能与抑制PI3K/Akt通路蛋白磷酸化及调节Bax/Bcl-2通路蛋白表达有关.

关键词：肝细胞癌、RNA干扰、胰岛素样生长因子1受体、PI3K/Akt、Bax/Bcl-2

所属期刊栏目：16

分类号：R73;S85

在线出版日期：2017-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1056-1060