基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞UHRF1定向编辑及其对单核细胞趋化蛋白-1影响的研究

摘要：

目的：对基于 CRISPR/ Cas9系统的猪内皮细胞泛素样含 PHD 和环指域1（UHRF1）定向编辑进行研究，并分析其对单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。方法靶向设计并构建 UHRF1基因外显子区域 gRNA 序列载体，并将其与 hCas9载体共转染猪内皮细胞制备单克隆抗体，并分析单核细胞趋化蛋白-1表达变化。结果本研究共获重组质粒5个，转染后获得细胞株 a、细胞株 b 和细胞株 c 三株 UHRF1蛋白表达极低细胞株；UHRF1蛋白敲除后单核细胞趋化蛋白-1和 MMP9、IL1、IL2及 Bax 蛋白表达分析水平明显降低而 Bcl2表达明显升高，且与野生型细胞株相比差异有显著的统计学意义（ P ﹤0.05）。结论成功获得基于 CRISPR/ Cas9系统的猪内皮细胞 UHRF1定向编辑，且获得细胞株内单核细胞趋化蛋白-1表达明显降低。

关键词：内皮细胞、定向编辑、单核细胞趋化蛋白-1、基质金属蛋白酶、细胞凋亡

所属期刊栏目：15

分类号：R3 ;R39

资助基金：深圳市科创委课题编号JCYJ20150330102720149

在线出版日期：2016-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1462-1465