OSX 基因沉默对醛固酮诱导的小鼠血管平滑肌细胞钙化的影响

摘要：

目的：研究成骨相关转录因子（OSX）沉默对醛固酮诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）成骨样分化和钙化的影响。方法体外原代培养小鼠的 VSMC。针对小鼠 OSX 基因设计合成小分子干扰 RNA（siRNA）序列，使用 Lipo 2000为载体，转染体外培养的 VSMC；FAM 荧光标记 siRNA 优化转染条件。实时 PCR 检测 OSX mRNA 表达。将 siRNA 序列转染 VSMC，细胞分为4组：①正常组；②醛固酮组（1.5 mmol/ L）；③siRNA 转染组：醛固酮+ OSX - siRNA；④阴性转染对照组：醛固酮+阴性对照 siRNA。实时 RT - PCR 及免疫印迹法检测 OSX、整联结合涎蛋白（Ibsp）基因和蛋白表达；茜素红染色观察细胞钙盐沉积。结果与醛固酮组相比，siRNA 转染组 OSX mRNA 表达在转染后24 h 及48 h 均明显低于醛固酮组（均 P ﹤0.01）；OSX 蛋白表达在转染后48 h 和72 h 均低于醛固酮组（均 P ﹤0.01），以48 h 最明显。siRNA有效沉默 OSX 基因表达后，OSX 转染组 Ibsp mRNA 和蛋白的表达低于醛固酮组（均 P ﹤0.01），而且细胞钙盐沉积低于高磷组。结论 OSX - siRNA 可以有效抑制 VSMC OSX 基因和蛋白的表达，从而抑制醛固酮诱导的 VSMC 成骨样分化和细胞钙化。OSX 可以成为 CKD 血管钙化治疗的靶点。

关键词：小鼠、siRNA、成骨相关转录因子、血管平滑肌细胞、醛固酮、钙化

分类号：R3 ;R78

资助基金：上海市自然科学基金项目编号12ZR1419000

在线出版日期：2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1228-1232