10.3969/j.issn.1671-4695.2013.07.004
影响磁珠共价偶联效率的因素分析
目的 研究不同条件下Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠与牛血清白蛋白(BSA)的偶联效率,探讨其影响因素.方法 分别取Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠与BSA混合,在不同的pH条件、不同的硫酸铵浓度和不同的BSA浓度下37℃振荡孵育18h,然后置于磁力架上静置2~3 min分离上清液.应用Bradford蛋白定量法对偶联前后的上清液进行蛋白定量分析,计算不同条件下的偶联效率.结果 当缓冲液pH值为9.5时偶联效率为1.12μgBSA/mg磁珠,pH值为7.4时偶联效率为0.41 μg BSA/mg磁珠;当反应体系中硫酸铵终浓度为1.2 mol/L时偶联效率为9.5 μg BSA/mg磁珠,硫酸铵浓度为0.8 mol/L时偶联效率为8μg BSA/mg磁珠;当偶联的BSA终浓度为0.4 mol/L时偶联效率为9.5μg BSA/mg磁珠,BSA浓度为0.6 mol/L时偶联效率为13 μg BSA/mg磁珠.结论 缓冲液pH值、硫酸铵浓度和BSA的浓度会影响Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠与BSA的偶联效率,该偶联过程在pH9.5、1.2 mol/L硫酸铵浓度和0.6 mol/L BSA的条件下进行较为适合.
磁珠、牛血清白蛋白、偶联条件、偶联效率
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TQ3;R96
北京市自然科学基金:膀胱癌尿液蛋白生物标志物的研究7122086;863重大专项子课题:游离脂肪酸与冠心病心肌损伤程度的相关性研究2011AA02A111
2013-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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