PP242对Ph+急性淋巴细胞白血病细胞增殖的抑制作用及对AKT1-Ser473磷酸化的影响

摘要：

目的 观察ATP竞争性哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)抑制剂PP242对体外培养的Ph染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖和AKT1473位丝氨酸磷酸化的影响.方法 对Ph+ ALL细胞株SUP-B15进行培养及传代,Cell Counting Kit-8比色法检测PP242(100 nM,250 nM,500 nM,750 nM,1 000 nM)处理细胞株SUP-B15后12 h、24 h、48 h细胞生长情况；应用免疫印迹法及实时定量RT-PCR检测使用PP242(100 nM,250nM,500 nM)培养细胞48 h后AKT1及磷酸化水平情况.结果 100 nM、250 nM、500 nM、750 nM、1 000 nM PP242对Ph+ ALL细胞株SUP-B15作用12 h、24h及48 h后,其抑制率:12 h组:10.17％,13.25％,20.13％,22.54％,27.61％；24h组:11.33％,20.54％,36.18％,41.66％,47.27％;48 h组:23.13％,39.24％,55.72％,61.88％,66.93％,与对照组相比差异均有统计学意义(P ＜0.05)；100 nM、250 nM、500 nM PP242处理SUP-B15细胞48 h后,免疫印迹法检测结果显示AKT1蛋白的表达水平无明显变化,而473位丝氨酸(Ser473)磷酸化水平逐渐降低；实时定量RT-PCR检测结果显示,AKT1的mRNA表达无明显变化,绝对定量mRNA结果分别为:0.673±0.124,0.751±0.133,0.689±0.154,与正常对照组(0.679±0.167)相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ATP竞争性mTORC2抑制剂PP242对体外培养的Ph+ ALL细胞株SUP-B15细胞的增殖存在抑制作用,其作用强度呈浓度和时间依赖性；SUP-B15细胞中存在AKT1的表达；PP242在抑制Ph+ ALL细胞株SUP-B15细胞的增殖过程中可下调AKT1 Ser473磷酸化水平.

关键词：Ph+急性淋巴细胞白血病、mTORC2、PP242、AKT1

所属期刊栏目：12

分类号：R74;R73

资助基金：教育部博士点新教师基金资助20092104120007

在线出版日期：2013-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：481-483,487