扶正化瘀方调节差异微小RNAs表达的抗肝纤维化的作用机制

摘要：

目的 筛选出扶正化瘀方(FZHY)调控的差异微小RNAs(miRNAs),并对这些差异miRNAs进行生物功能分析,部分揭示FZHY抗肝纤维化的作用机制.方法 CCl4皮下注射制备小鼠肝纤维化模型,分为正常组、模型组及FZHY组;自造模前3d开始给药,1次/d,共8周.天狼星红染色及羟脯氨酸(Hyp)含量测定观察肝组织胶原沉积.应用miRNAs芯片检测各组小鼠肝脏miRNAs表达谱.基于miRNAs表达谱筛选出正常组、FZHY组与模型组具有相同变化趋势的差异miRNAs,即FZHY调控的miR-NAs,并以qRT-PCR进行验证.采用TargetScan及PITA数据库对miRNAs靶基因进行预测,并采用DAVID数据库对这些预测的靶基因进行功能分析及信号通路分析,发现其调控的显著性功能及信号通路.多组间比较采用方差分析,miRNA差异基因筛选采用随机方差模型的t检验.结果 FZHY可明显降低纤维化肝组织Hyp含量,减轻胶原沉积.miRNAs芯片分析共发现3个FZHY调控的miRNAs,分别为:mmu-miR-322 、mmu-miR-342-3p和mmu-miR-296-5p.信号通路分析共得到32条这些miRNAs可能调控的信号通路,其中趋化因子信号通路、黏着斑、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、肌动蛋白细胞骨架调节、间隙连接、细胞外基质蛋白相互作用、Wnt信号通路、Jak-STAT信号通路等与肝纤维化密切相关;功能富集分析共得到32项显著性功能,其中三磷酸尿苷(GTP)酶活性调节、细胞连接、凋亡调节、Ras蛋白信号转导调节及小GTP酶活性调节等与肝纤维化密切相关.结论 下调miR-322,miR-342-3p及miR-296-5p表达,从而调节这些miRNAs对应的相关功能,如MAPK信号通路、Wnt信号通路、凋亡调节及Ras蛋白信号转导调节等可能是扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制,值得进一步研究.

关键词：肝硬化、扶正化瘀方、微RNAs、寡核苷酸序列分析

所属期刊栏目：32

分类号：R575.2(消化系及腹部疾病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30901943,81270053,81573810

在线出版日期：2016-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：503-508