GRP78的表达对急性肺损伤上皮细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响

摘要：

目的 探究免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78)的表达量降低对急性肺损伤(ALI)上皮细胞凋亡、增殖以及核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 采用脂质体Lipofectamine 2000将siRNA-GRP78转入肺上皮MLE-12细胞中,使用10μg/mL脂多糖(LPS)作用于生长状态良好的细胞24 h,建立急性肺损伤模型.实验分为4组:对照组为未经处理的细胞,模型组为LPS干预的细胞,空载体组为先把siRNA-NC转入细胞中然后经LPS干预,低表达组为先把siRNA-GRP78转入细胞中后经LPS干预.CCK-8检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中GRP78、P65、核因子κB抑制蛋白(IκB)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达量.结果 与对照组相比,模型组、空载体组、低表达组细胞中GRP78蛋白的表达量显著升高(P<0.05);与模型组相比,低表达组显著降低(P<0.05).与对照组相比,模型组、空载体组、低表达组细胞的存活率显著下降(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05);与模型组相比,低表达组细胞的存活率显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05).与对照组相比,模型组和空载体组细胞中P65(P<0.05)、IκB(P<0.05)、CyclinD1(P<0.05)蛋白的表达量显著降低;与模型组相比,低表达组细胞中P65、IκB、CyclinD1蛋白的表达量显著升高(P<0.05).结论 下调GRP78表达抑制急性肺损伤上皮细胞凋亡,促进其增殖,其作用机制可能是通过抑制NF-κB信号通路介导的下游靶基因的表达来发挥作用.

关键词：GRP78、NF-κB信号通路、急性肺损伤、CyclinD1

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在线出版日期：2018-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1824-1828