CAV1在人肺动脉成纤维细胞增殖调控中的作用

摘要：

目的 研究小窝蛋白1(CAV1)在缺氧相关肺动脉成纤维细胞(PAFs)增殖调控中的作用.方法 将体外培养的人PAFs分为:对照组(C:21%O2);10%氧浓度组(10%O2);5%氧浓度组(5%O2)及2%氧浓度组(2%O2)进行细胞增殖实验,选取细胞增殖最明显组为缺氧组(H)进行后续实验.并构建CAV1高表达质粒(pCAV1),然后再将PAFs分为对照组(C:21%O2),缺氧组(H),空白对照组(NC:缺氧+空质粒转染组)和CAV1高表达组(pCAV1:缺氧+pCAV1转染组),采用Western-blot法检测各组细胞中CAV1、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和细胞凋亡抑制蛋白2(c-IAP2)含量,四甲基偶氮唑蓝(MTT)及增殖细胞核抗原(PC-NA)免疫组化法检测细胞增殖情况.结果 缺氧能刺激PAFs增殖,并呈浓度依赖性,于2%氧浓度刺激48小时PAFs增殖达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(1.20+0.02 vs 0.54+0.04,P<0.01);缺氧组PAFs中CAV1表达下调(1.23±0.04 vs 0.90±0.02,P<0.01),cyclinD1(0.19±0.03 vs 1.15±0.06,P<0.01)和c-IAP2(0.63±0.04 vs 0.78±0.09,P<0.01)表达上调,细胞增殖增加(MTT:0.78±0.04 vs 1.20±0.02,P<0.01;PCNA:0.29±0.03 vs 0.54±0.03,P<0.01);CAV1在PAFs中高表达后(0.55±0.03 vs 0.90±0.03,P<0.01),cyclinD1(0.88±0.02 vs 0.52±0.02,P<0.01)和c-IAP2(0.87±0.02 vs 0.72±0.02,P<0.01)表达下调,PAFs增殖减少(MTT:1.20±0.02 vs 1.00±0.06,P<0.01;PCNA:0.52±0.03 vs 0.38±0.03,P<0.01).结论 缺氧能通过下调CAV-1在PAFs中的表达,促进PAFs的增殖、抑制其凋亡.cyclinD1和c-IAP2可能是CAV1调控PAFs增殖和凋亡的下游靶点.

关键词：缺氧、PAH、小窝蛋白1、肺动脉成纤维细胞

所属期刊栏目：22

分类号：R73;R96

资助基金：苏州市科教兴卫青年科技项目KJXW2013006;苏州市产业技术创新专项应用基础研究项目SYS201530

在线出版日期：2017-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：399-403