结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6 kDa蛋白原核载体的构建及在E.coli中的高效表达

摘要：

目的 获得高效表达的结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6 kDa蛋白(ESAT-6).方法 利用PCR方法扩增出ESAT-6基因片段,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-21b(+),酶切分析和序列测定鉴定出ESAT-6基因的阳性重组子,将其转化入E.coli BL21(DE3),阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达;重组蛋白经Ni-NTA His*BindResins纯化.结果 成功扩增出ESAT-6基因片段,构建了重组表达质粒pET-ESAT-6,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为6 kD,经亲和纯化后的ESAT-6重组蛋白纯度高,且能被结核病人血清所识别.结论 利用pET原核表达系统成功的对结核分枝杆菌ESAT-6重组蛋白进行高效表达和纯化,重组蛋白具有良好的免疫活性.

关键词：结核分枝杆菌、早期分泌抗原靶6 kDa蛋白、原核表达

所属期刊栏目：15

分类号：R37;R3

资助基金：深圳市科技计划项目200701008

在线出版日期：2010-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：823-825