p21和p53基因甲基化在喉鳞状细胞癌中的差异化表达及生物学意义

摘要：

目的:研究p21、p53基因甲基化在喉癌组织和喉癌细胞系Hep-2中的机制.方法:用甲基化特异性PCR检测46例配对的喉癌组织和癌旁组织中p21、p53基因甲基化情况;用MTT法检测去甲基化药物5-azacyti-dine及作用时间对喉癌细胞系Hep-2增殖的影响;用TUNEL法检测5-azacytidine及作用时间对喉癌细胞系Hep-2凋亡的影响.同时,采用RT-PCR法检测干预前后p21基因mRNA的差异,并采用MSP法检测干预前后p21基因启动子区CpG岛甲基化状态变化.结果:喉癌组织、癌旁组织中p21基因启动子区CpG岛甲基化率分别为45.7％和10.9％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);喉癌组织、癌旁组织中p53基因甲基化率分别为6.5％和4.3％,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05).5-azacytidine对Hep-2细胞增殖的抑制作用随着时间的延长逐渐增加,呈时间依赖性;同时,随着天数的增加,细胞凋亡率增加.Hep-2细胞在5-azacytidine干预后p21基因被激活,表达明显增高.喉癌细胞系Hep-2中p21基因甲基化程度为43.13％±0.79％,经5-azacytidine干预后,甲基化程度明显下降,甚至表现为无甲基化.结论:喉癌组织和喉癌细胞系Hep-2中存在p21基因高甲基化,是喉癌区别于正常组织的分子事件.p53基因在喉癌组织和喉癌细胞系Hep-2中低甲基化,其基因的失活可能通过基因突变等其他形式来发生.去甲基化药物5-azacytidine可以通过诱导p21基因启动子CpG岛去甲基化修饰,改变肿瘤细胞细胞周期基因的调控,促进肿瘤细胞凋亡.

关键词：喉肿瘤、p21、p53、甲基化

所属期刊栏目：30

分类号：R739.65(肿瘤学)

在线出版日期：2016-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1634-1638