喉癌耐药细胞株Hep-2/5-Fu的建立及其差异表达基因的筛选
目的:建立喉癌细胞耐药模型Hep-2/5-Fu并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-Fu大剂量浓度逐渐递增间歇给药的方法建立人喉癌耐药细胞Hep-2/5-Fu,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定其耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术检测耐药细胞株Hep-2/5-Fu与其亲本细胞株Hep-2中的差异表达基因,从中筛选出可能的耐药相关基因;用半定量RT-PCR法进行验证.结果:Hep-2/5-Fu细胞与Hep-2细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,并对顺铂及长春新碱有不同程度的交叉耐药性.通过基因芯片筛选出差异表达基因1 210个,可能的耐药相关基因包括Cyclin D、IGF BP3、CASP9、CDK4/6,其中Cyclin D在Hep-2/5-Fu中的表达是亲本细胞的6.599 7倍.结论:Hep-2/5-Fu细胞株耐药性稳定,耐药机制可能与Cyclin D等耐药相关基因有关.
喉肿瘤、耐药相关基因、5-氟尿嘧啶、Hep-2/5-Fu细胞株、MTT法、基因芯片、逆转录-聚合酶链反应
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R739.65(肿瘤学)
上海仁济医院科研培育基金项目资助RJPY10-011
2013-02-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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