10-23脱氧核酶靶向抑制喉癌eIF4E基因表达的实验研究

摘要：

目的:在细胞水平上探讨10-23脱氧核酶(DNAzyme)成为新型喉癌基因治疗药物的可能性.方法:设计合成针对原癌基因eIF4EmRNA编码区的1059位点的10-23DNAzyme,并对其进行硫代磷酸化修饰,经脂质体转染Hep-2细胞,倒置相差荧光显微镜观察Hep-2细胞对5-FAM荧光素标记10-23DNAzyme的摄取,流式细胞仪计算转染效率,半定量RT-PCR、western blot观察其对喉癌eIF4E基因表达的抑制效应.结果:倒置相差荧光显微镜观察在转染12、24、36、48 h后,阳性转染的细胞均可发出绿色荧光,流式细胞仪检测转染效率分别为60%、85%、90%、89%;修饰的10-23DNAzyme作用于Hep-2细胞后可显著抑制eIF4E基因的表达, 明显低于作为对照的转染空脂质体组和Hep-2细胞组(均P＜0.05).结论:经过硫代化修饰的10-23DNAzyme在细胞水平上能高效阻断eIF4E基因的表达,是一种高度特异性的、高效的基因治疗剂.

关键词：喉肿瘤、脱氧核酶、eIF4E基因、基因治疗

所属期刊栏目：21

分类号：R739.65(肿瘤学)

资助基金：吉林大学校科研和教改项目K205

在线出版日期：2007-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：552-554