大鼠耳蜗感觉上皮细胞的原代培养及其意义

摘要：

目的:建立大鼠耳蜗感觉上皮细胞(CSEC)的原代培养体系,为研究毛细胞再生的分子机制提供大量来源一致的细胞.方法:取出生1 d(P1)的大鼠耳蜗感觉上皮(Corti器)作组织块培养,选择性消化抑制成纤维样细胞(FLC)生长;应用有限稀释法纯化CSEC,倒置显微镜下观察CSEC的形态、生长特征;应用细胞角蛋白18、波形蛋白、Brn3.a和Calretinin的免疫细胞化学及透射电镜等进行鉴定.BrdU标记CSEC核DNA观察CSEC有丝分裂活动.结果:培养第2天CSEC从组织块迁移出来,呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈"铺路石样"外观;FLC呈梭形"鱼群样"包绕CSEC生长,增殖速度快于CSEC.由纯化的CSEC构成的上皮单层可见由成百个CSEC包绕液体形成的dome.CSEC表达毛细胞的特征性标志物,证实培养的CSEC具有毛细胞前体细胞的特征;并通过有丝分裂活动产生新的细胞即毛细胞样细胞.结论:体外培养的CSEC表达毛细胞特征性标志物,具有毛细胞前体细胞的特征.CSEC原代培养体系的建立,为进一步探讨毛细胞再生的分子机制提供了实验条件.

关键词：耳蜗、感觉上皮细胞、原代培养、毛细胞

所属期刊栏目：21

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金39925035;教育部高校骨干教师资助计划200065;中国耳神经疾病早期干预措施及规范化治疗方案研究基金2004BA720A18-02

在线出版日期：2007-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：27-31