NPA motif在水通道蛋白AQP1表达和转水功能中的重要性

摘要：

水通道蛋白(AQP)序列中的两个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸序列(NPA motif)是水通道蛋白家族中高度保守的特征性序列,其晶体结构研究显示,两个NPA motifs位于通道中心的狭窄部位,直接参与水分子的结合和选择性通过.为了进一步研究两个NPA motifs在水通道蛋白结构、功能和生源学(biogenesis)方面的重要性,通过点突变方法分别获得单独缺失NPA1或NPA2 motif以及同时缺失两个NPA motifs的3种水通道AQP1基因突变型.将3种AQP1突变cDNA分别亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,建立稳定转染3种AQP1基因突变型的CHO细胞系.AQP1免疫荧光分析显示,3种AQP1突变蛋白均能正常表达并定位于质膜,显示AQP1蛋白质表达和细胞内加工过程未受NPA motifs缺失的影响.分别对表达3种AQP1突变蛋白的CHO细胞进行质膜水通透性功能分析,并与表达野生型AQP1的CHO细胞进行比较,结果显示,缺失NPA1或NPA2引起AQP1转水功能下降49.6%和 46.7%,而同时缺失两个NPA motifs的AQP1转水功能与野生型AQP1相似.上述结果显示,水通道AQP1中的NPA motifs在AQP1转水功能中发挥重要作用,但对于AQP1蛋白的表达、细胞内加工和通道基本结构的形成并不起关键作用.

关键词：水通道蛋白、NPA motif、突变、水通透性、生源学(biogenesis)

所属期刊栏目：52

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：国家自然科学基金30325011;国家自然科学基金30470405;30670477;吉林省杰出青年科学基金20030112;教育部高校骨干教师资助计划

在线出版日期：2007-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：426-431