利用酵母双杂交系统研究斯氏假单胞菌固氮调节蛋白NifL和NifA的相互作用

摘要：

@@ 固氮斯氏假单胞菌A1501(Pseudomonas stutzeri, 原称粪产碱菌A1501)于1980年分离自中国南方水稻田, 能紧密结合于宿主植物的根表或侵入根内进行生长繁殖和固氮作用, 但化合态氮和氧的存在限制了联合固氮效率. 本实验室已从该菌中克隆了DNA片段大小为30 kb, 包含完整nifLA-like基因的nif基因簇, 并完成了全核苷酸序列分析(EMBL/GenBank登录号: AJ297529)[1]. 遗传学分析表明, 该菌与肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)可能具有相似的nifLA操纵子结构. 由于nifA的突变导致固氮酶活性消失, 因此NifA可能作为固氮基因的正调节因子, 激活其他nif基因的表达, 而nifL的突变导致重组菌的固氮比活力、耐铵能力均明显增强, 推测NifL可能作为固氮基因的负调节因子, 在有NH4+和O2 的条件下, 阻遏nif基因的表达(结果未显示). 从而, 对NifL的作用机理提出了2种不同的假说: (ⅰ) NifL作为阻遏蛋白作用于其他nif基因的启动子; (ⅱ) NifL感受铵、氧、能量状态来调节NifA蛋白的活性, 进而阻遏nif基因的表达[2,3]. 本研究利用酵母双杂交系统对NifL调节nif基因表达的作用机理进行了探讨.

机标关键词：酵母双杂交系统、系统研究、固氮斯氏假单胞菌、基因表达、作用机理、调节因子、核苷酸序列分析、肺炎克氏杆菌、固氮酶活性、阻遏蛋白、中国南方、宿主植物、生长繁殖、化合态氮、固氮作用、固氮效率、粪产碱菌、子结构、重组菌、遗传学

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分类号：TN ;R38

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划001CB108904;国家高技术研究发展计划863计划2001AA214021

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：97-99