10.3321/j.issn:0023-074X.1999.06.014
人神经生长因子β亚基的基因在P.pastoris和E.coli中的表达
将hNGFB基因插入甲醇营养性酵母P.pastoris分泌表达载体pHIL-S1和E. coli表达载体pET-15b中,相应转化P.pastoris GS115 (Mut+, His-)和E. coli BL21(DE3). 在不含组氨酸平板上生长的酵母转化子通过PCR进一步筛选阳性克隆,P.pastoris重组菌株的蛋白电泳表明发酵液中有特异表达带,扫描分析占细胞外泌总蛋白的14.4%,Western blotting证实该分泌蛋白具有hNGF的免疫活性. E. coli重组菌株在IPTG的诱导下表达融合蛋白. 电泳扫描分析表达的融合蛋白占细胞总蛋白量的10.3%,Western blotting检测表明具有免疫活性.
人神经生长因子、P. pastoris、分泌表达、pET-15b、融合蛋白
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Q81(生物工程学(生物技术))
2006-01-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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