ARHGAP29调控小鼠腭突间充质细胞增殖能力的研究

摘要：

目的:探讨ARHGAP29对小鼠腭突间充质细胞增殖能力的影响.方法:免疫组织化学染色确定ARHGAP29在腭突组织中的表达;体外培养GD13.5小鼠腭突间充质细胞,免疫荧光染色鉴定细胞来源;合成3条Arhgap29基因特异性小干扰RNA进行体外沉默实验,利用Real-time PCR和Western blot检测沉默效率;CCK-8法检测Arhgap29基因沉默后腭突间充质细胞增殖能力的改变;实验结果采用GraphPad Prism 8.0.2软件进行统计学分析.结果:免疫组织化学结果示ARHGAP29在GD13.5小鼠腭突组织中显著表达;免疫荧光染色结果显示Vimentin染色的腭突间充质细胞包浆着色,绿色荧光表达强,Cytokeratin染色的细胞未见有阳性表达;Real-time PCR和Western blot结果显示,相较于阴性对照组和空白对照组,实验组ARHGAP29 mRNA和蛋白表达水平明显降低,其中Arhgap29-siRNA3的沉默效果最好(P<0.001);CCK-8结果显示体外沉默Arhgap29基因48 h后腭突间充质细胞的增殖能力开始上升,转染72 h细胞的增殖能力显著增强(P<0.05).结论:ARHGAP29可能通过促进腭突间充质细胞的增殖,在腭突发育阶段造成腭突与口腔上皮的黏连,从而影响腭部的正常发育.

关键词：ARHGAP29、腭突间充质细胞、RNA干扰、细胞增殖

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资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;陕西省重点研发计划重点产业创新链群重点项目;宁夏自然科学基金项目;宁夏医科大学总医院公立医院综合改革-重点学科建设及人才培养项目;宁夏医科大学总医院自治区临床研究中心开放课题;宁夏医科大学校级项目

在线出版日期：2022-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：275-279