10.13701/j.cnki.kqyxyj.2020.12.014
自噬通过GATA4调控人牙髓细胞衰老反应
目的:探究脂多糖(lipopolyasccharide,LPS)诱导的炎症微环境下,自噬对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)衰老反应的调控作用.方法:体外分离培养hDPCs,10μg/L LPS连续刺激hDPCs 6 d,并分别利用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)与GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA4)小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)进一步处理hDPCs.Western blot检测不同处理条件下hDPCs内GATA4、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)、衰老相关蛋白p53及p16的表达变化.细胞免疫荧光染色检测不同处理条件下LC3的表达,并对衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosi-dase,SA-β-Gal)进行染色.结果:LPS连续刺激hDPCs后,LC3、GATA4、p53、p16的表达及SA-β-Gal阳性细胞数增加;3-MA抑制hDPCs自噬后,GATA4、p53及p16的表达及SA-β-Gal阳性细胞数进一步增加;敲低GATA4后,LC3表达无变化,而p53、p16的表达及SA-β-Gal阳性细胞数明显降低.结论:在LPS诱导的炎症微环境下,自噬通过GATA4负性调节hDPCs的衰老反应.
人牙髓细胞、炎症、自噬、GATA结合蛋白4、衰老
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国家自然科学基金编号:81870761
2021-01-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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