磷灰石上的粘附、增殖及成骨分化 人根尖乳头干细胞在羟基磷灰石和聚多巴胺-羟基

摘要：

目的:提取、鉴定人根尖乳头干细胞(hSCAPs),接种于羟基磷灰石生物陶瓷(HAP)和聚多巴胺-羟基磷灰石生物陶瓷(PDA-HAP)上,对比两种支架的细胞粘附、增殖及成骨分化能力.方法:(1)改良组织块法提取hSCAPs,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原:STRO-1、CD90、CD146、CD45、CD34.(2)hSCAPs分别接种于HAP组和PDA-HAP组,DAPI和鬼笔环肽分别对细胞核和骨架染色,观察细胞形态,计数行统计分析.(3)hSCAPs分别接种于HAP组和PDA-HAP组,培养1、3、5、7 d,CCK8测量A值检测细胞增殖情况.(4)hSCAPs接种于HAP组和PDA-HAP组,培养1、7、14 d,检测ALP活性,Real-time PCR检测ALP、OCN和Runx2表达量.结果:(1)所提hSCAPs表达STRO-1(+)、CD90(+)、CD146(+)、CD45(-)、CD34(-).(2)PDA-HAP组较HAP组上附着的hSCAPs数目更多(P<0.001),且PDA-HAP上的细胞相较HAP上的面积更大,伸展更充分,可见明显的细胞触角.(3)HAP和PDA-HAP培养hSCAPs1、3、5、7 d毒性均无明显差异(P>0.05).(4)ALP活性:诱导第1天、14天两组活性差异无统计学意义(P>0.05),但第7天PDA-HAP组明显高于HAP组(P<0.001).Real-time PCR:ALP的表达情况与ALP活性结果一致;Run x2于1、7、14 d均为PDA-HAP组高于HAP组,差异有统计学意义(P<0.05);OCN第1天两组差异无统计学意义(P>0.05),在第7天、14天PDA-HAP组均较HAP组高(P<0.05).结论:PDA-HAP较HAP能明显促进hSCAPs粘附、成骨相关特异基因ALP、Runx2、OCN的表达,促进hSCAPs成骨分化.

关键词：人根尖乳头干细胞、聚多巴胺、羟基磷灰石生物陶瓷、成骨分化

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资助基金：四川省科技重点研发项目编号:2018FZ0113中华口腔医学会西部行口腔医学临床科研基金编号:CSA-W-2016-01四川省科技支撑计划项目编号:2014SZ0038四川省医学科研青年创新课题编号:Q14054

在线出版日期：2020-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：523-527