骨桥蛋白对巨噬细胞极化影响的体外实验研究

摘要：

目的:探究外源性骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在体外对巨噬细胞极化为M1型或M2型的影响.方法:体外培养小鼠RAW264.7细胞,进行以下分组实验:(1)OPN浓度梯度实验:设定对照组,实验组加入不同浓度OPN(0.1、0.5、1.0 mg/L);(2)M1型极化实验:设定对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、OPN组、LPS+OPN组;(3)M2型极化实验:设定对照组、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)组、OPN组、IL-4+OPN组.培养24 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析M1型基因诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-1β(inter-leukin-1β,IL-1β)及M2型基因CD206、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的mRNA表达;Western blot检测iNOS、Arg-1的蛋白表达;免疫荧光检测iNOS、CD206的表达.结果:qRT-PCR显示,与对照组比较,OPN组的M1型基因iNOS、TNF-α、IL-1β及M2型基因CD206、Arg-1、IL-10的mRNA表达均上调(P<0.05),并呈浓度依赖关系;LPS+OPN组的M1型基因表达上调最高,IL-4+OPN组的M2型基因表达上调最高(P<0.05);Western blot、免疫荧光与qRT-PCR结果一致.结论:OPN作为一种多效性细胞因子,可能促进巨噬细胞向M1型或M2型极化,并与极化诱导剂LPS和IL-4具有潜在的协同促进作用.

关键词：骨桥蛋白、巨噬细胞、M1、型极化、M2

所属期刊栏目：35

资助基金：国家自然科学基金31570982

在线出版日期：2019-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：497-501