10.13701/j.cnki.kqyxyj.2019.01.007
过表达Notch1的胞内段基因对人牙周膜干细胞增殖能力影响
目的:探讨过表达Notch1的胞内段(Notch1 intracellular domain,NICD)基因对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖能力的影响.方法:构建含NICD基因过表达的逆转录病毒颗粒,并将其转染至牙周膜干细胞,构建过表达NICD的细胞株PDLSCs/NICD,转染48 h后观察细胞一般状态.PDLSCs/NICD为实验组,以PDLSCs/wt为正常细胞组和PDLSCs/vector空病毒转染组作为对照,通过实时定量聚合酶链锁反应(quantitative Real-time-Polymerase chain reaction,qRT PCR)和Western blot检测NICD mRNA及其蛋白的表达;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的增殖情况;Transwell实验检测细胞的迁移能力.结果:Western blot和qRT PCR结果显示,与PDLSCs/wt组和PDLSCs/veetor组比较,PDLSCs/NICD组的NICD蛋白表达水平及其mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);CCK-8结果提示,与PDLSCs/vector组比较,PDLSCs/NICD组细胞增殖速度加快,Transwell实验结果显示,PDLSCs/NICD组的细胞迁移(40.20±1.74)明显高于PDLSCs/vector组(21.20±1.18).结论:NICD基因过表达的人PDLSCs在一定程度上增殖及迁移能力加强.
牙周膜干细胞、Notch1的胞内段、转染、增殖、迁移
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国家自然科学基金81460103
2019-08-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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